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人脂肪酸轉運蛋白1elisa試劑盒的主要原理及具體操作步驟

  • 發布日期:2023-06-09      瀏覽次數:456
    •   人脂肪酸轉運蛋白1elisa試劑盒是一種重要的膜蛋白,它參與了細胞對脂肪酸的攝取和代謝。如今,ELISA試劑盒已被廣泛應用于FATP1的檢測和研究。主要原理是利用特異性抗體與待測樣品中的FATP1結合,再加入辣根過氧化物酶-標記的二抗,最后通過底物反應顏色變化來定量檢測FATP1含量。
        

       

        
        1.樣品預處理:待測樣品應該是清晰的液態樣品,在收集前加入保護劑如丙二醇、乙二醇或BSA。可用離心機去除雜質和固體顆粒。
        
        2.樣品稀釋:將樣品按照試劑盒中的建議稀釋,通常情況下,建議將樣品稀釋至100倍以上,以避免高濃度樣品的干擾。
        
        3.添加標準品:取出試劑盒中提供的標準品,并按照說明書中的指導進行稀釋。將標準品分別加入不同的孔中,作為比較參照。
        
        4.加入檢測抗體:將試劑盒中提供的檢測抗體加入到每個孔中,與有FATP1的標準品和待測樣品結合。
        
        5.加入辣根過氧化物酶標記的二抗:將試劑盒中提供的辣根過氧化物酶標記的二抗加入到每個孔中,與檢測抗體結合。
        
        6.加入TMB底物液:將試劑盒中提供的TMB底物液加入到每個孔中,這將導致底物分解并產生顏色變化。
        
        7.加入停止溶液:在顏色出現之后,加入停止溶液,停止底物反應,并使顏色穩定。
        
        8.讀取結果:在波長450nm下使用微孔板讀板器或光度計讀取結果。